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您的位置:首頁>>生命科學>>CRISPR系列>>HA11726-ZL pET28TEV-LwaCas13a 質粒 (1 μg 干粉)
Cat. Number
HA11726-ZL
Chemical Name
HA11726-ZL pET28TEV-LwaCas13a 質粒 (1 μg 干粉)
Qty 1
1ug
References

pET28TEV-LwaCas13a 質粒是 LwaCas13a(又名 LwaC2c2)蛋白的表達質粒,用于在大腸桿菌 BL21(DE3) 菌株中表達制備 LwaCas13a 蛋白。該質粒含有乳糖操 縱子誘導表達系統,可以用 IPTG 或乳糖及其類似物誘導表達目的蛋白。


LwaCas13a 核酸酶是依賴于 RNA 介導的 RNA 內切核酸酶。在靶標單鏈 RNA 存在 PFS 序列的情況下,可特異地識別并切割靶標 RNA。此外,Cas13a 也具有依賴于靶標單鏈 RNA 的反式切割活性(即旁路切割活性/反式切割活性),可在靶標 RNA 存在的情況下激活 Cas13a,將體系中 的單鏈 RNA 切碎,該活性也被用于靶標核酸的快速檢測試劑盒的開發。例如,Broad 研究所的張鋒團隊便 利用 Cas13a 蛋白開發了名為 “SHERLOCK” 的下一代分子診斷系統(PMID: 28408723)。


訂購信息:

產品名稱規格
推薦濃度
pET28TEV-LwaCas13a 質粒1 μg 干粉20 μL, 50 ng/μL


產品組成:

pET28TEV-LwaCas13a 質粒 (1 μg 干粉)。 


保存條件: 

4℃儲存;≤ 4℃運輸。


產品特點:

名稱描述
質粒類型             大腸桿菌表達 LwaCas13a 蛋白質
質粒大小8749 bp
蛋白大?。ㄇ谐龢撕灪螅?nbsp;138.5 KDa
等電點 (PI) (切除標簽后)9.22
蛋白標簽 6 × His Tag
標簽切除蛋白酶位點 TEV 蛋白酶
啟動子 T7 Promoter
復制子 pBR322 
終止子T7 terminator
表達宿主 大腸桿菌 BL21(DE3)或其它含有 T7 RNA 聚合酶的
培養條件  LB 培養基,37℃
抗性  Kan
誘導劑IPTG 或乳糖及其類似物
5' 測序引物T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
3' 測序引物 T7-ter: 5'-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'


產品圖譜:

QAD9I5A0YK$9XF(25D6]8YW.png

注意事項 

1. 轉化后使用 Kan 抗性平板篩選。 

2. 除 E. coli BL21(DE3)外,該質粒還可以轉入其它含有 DE3 片段或表達 T7 RNA 聚合酶的菌株,用于表 達該目的蛋白。由于該質粒帶有 Kan 抗性基因,需要使用 Kan 抗性平板篩選,故宿主菌株本身不能帶 有 Kan 抗性。 

3. 本產品僅供科研使用。


蛋白表達過程中相關試劑:

HA21014 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG

無水乳糖

E-005 重組TEV蛋白酶


LB培養基(1L)配置方法:

胰蛋白胨 Tryptone                                     10g

酵母浸粉 Yeast extract powder                   5g

氯化鈉                                                        10g

攪拌溶解后,121℃高壓滅菌半小時,無菌環境下冷卻至室溫,加入菌液,37℃搖床過夜培養即可


相關Crispr/cas酶:

重組CRISPR-Cas9蛋白 

重組CRISPR-Cas12a蛋白

重組CRISPR-LwaCas13a蛋白

LbuCas13a 核酸酶

AapCas12b 核酸酶

AacCas12b 核酸酶

AsCas12a(cpf1)

FnCas12a(cpf1)

AapCas12b

AacCas12b(C2c1)

CRISPR LbCas12a(cpf1)

CRISPR BbCas12a(cpf1)

CRISPR HkCas12a(cpf1)蛋白

OsCas12a(cpf1)蛋白

BoCas12a(cpf1)蛋白

TsCas12a(cpf1)蛋白

dCas9蛋白

Cas14a1核酸酶


目前在蘇州和南通的研發生產基地,專注于體外診斷蛋白,靶標蛋白,工業用酶和細胞因子的生產和定制,按照GMP標準,為工業客戶提供大包裝蛋白原料。


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