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您的位置:首頁>>生命科學>>CRISPR系列>>EH0506 LbuCas13a 核酸酶
Cat. Number
EH0506
Chemical Name
EH0506 LbuCas13a 核酸酶
Qty 1
100pmol
Qty 2
500pmol
References

LbuCas13a是一種來源于細菌 Leptotrichia buccalis的Cas13a效應蛋白。它屬于IV型CRISPR-Cas系統,可利用CRISPR RNA(crRNA)來識別和切割RNA。LbuCas13a相對分子質量約為132kDa。它包含兩個高度保守的結構域:HEPN和RuvC,與crRNA結合后可激活其內切酶活性,對RNA進行切割。

本產品由E.coli表達的重組蛋白,是將蛋白基因接入穩定表達載體,經克隆篩選,質量驗證,挑選的穩定表達株,由化學成分確定的培養基(不含有任何動物源成分)發酵制備,工藝穩定,保證了產品質量及批次間的一致性。


規格參數:

貨號:EH0506      

規格:100/500pmol.

為工業客戶提供n*500pmol規格


質量控制:

純      度: 

經高效液相色譜(SEC-HPLC)和SDS-PAGE檢測,純度大于95%.

 

使用說明:

長期儲存于-80℃,首次使用后保存于-20℃,避免反復凍融。


技術原理:

LbuCas13a通過堿基配對識別crRNA和目標RNA之間的同源序列,與之結合后激活,在目標RNA進一步切割其他區域,這被稱為“異核酶的自恢復特征”。該過程可導致高效的RNA分解。 


特點與優勢:

(1) LbuCas13a可特異性識別和切割RNA,而非DNA,這令其成為CRISPR系統中首個RNA靶向的工具。

(2) LbuCas13a具有RNA的自恢復切割功能,可導致RNA高效降解,這有利于RNA的功能研究及基于RNA的治療方法的開發。

(3) LbuCas13a對溫度和離子環境不太敏感,在寬范圍的條件下保持穩定和活性,易于保存及操作。

(4) LbuCas13a可識別不同長度(約23-38 bp)的crRNA,這為其RNA靶向帶來更高的靈活性。


LbuCas13a在以下方面具有重要應用潛力:

(1) RNA功能研究:實現特定RNA的敲除與破壞,用于研究RNA在生物體中的生理功能。

(2) RNA病毒檢測與治療:可用于檢測和抑制RNA病毒的增殖。

(3) 離體和在體基因治療:利用LbuCas13a表達載體傳遞crRNA,抑制靶細胞內的病理性RNA。 

(4) 體外RNA檢測:設計與靶RNA同源的crRNA,檢測樣本中靶RNA的存在與表達水平。

(5) 農業病害治療:抑制植物病原體中的關鍵RNA,達到防治作用。


LbuCas13a在體外診斷領域有重要的應用潛力:

1. RNA病毒檢測

設計與RNA病毒基因組高度保守的區域互補的crRNA,可特異性檢測該病毒的存在,用于臨床病毒性疾病的快速診斷。 

2. 體外RNA表達檢測

針對特定RNA標記物設計crRNA,可檢測樣本中靶RNA的表達水平,用于癌癥診斷、疾病檢測等。

工作流程如下:

(1) 設計與靶RNA高度同源的crRNA序列。

(2) 將crRNA與待檢測樣本RNA共孵育。

(3) 如果存在互補的靶RNA,LbuCas13a與之結合并激活,對靶RNA進行切割。

(4) 通過qPCR檢測LbuCas13a切割產物或其活性,判斷靶RNA的存在與表達量。

(5) 該方法靈敏度高、特異性強,可實現RNA的高通量檢測,相比傳統方法更加簡便快速。

3. 細胞RNA譜檢測

利用LbuCas13a及對應的crRNA庫,可以檢測細胞中全 transcriptome RNA的表達變化,用于藥理學研究、疾病診斷等。 

4. 病原體RNA檢測

針對病毒、細菌等病原體的保守RNA區域設計crRNA,實現特異性病原體檢測,用于臨床快速診斷。

5. 非編碼RNA檢測

設計與靶向miRNA、lncRNA等互補的crRNA,實現非編碼RNA的高通量檢測與定量分析。


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