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您的位置:首頁>>生命科學>>CRISPR系列>>EH00402 AapCas12b 核酸酶
Cat. Number
EH00402
Chemical Name
EH00402 AapCas12b 核酸酶
Qty 1
100pmol
Qty 2
1000pmol
References

AapCas12b 來源于嗜酸耐熱菌 Alicyclobacillus acidiphilus,最佳剪切反應溫度為 60℃,比 AacCas12b更耐高溫。它屬于II型CRISPR-Cas系統,可利用crRNA來識別和切割DNA。AapCas12b相對分子質量約為180kDa。它包含一個核酸酶結構域,可與crRNA和DNA結合進行切割。

本產品由E.coli表達的重組蛋白,是將蛋白基因接入穩定表達載體,經克隆篩選,質量驗證,挑選的穩定表達株,由化學成分確定的培養基(不含有任何動物源成分)發酵制備,工藝穩定,保證了產品質量及批次間的一致性。


規格參數:

貨號:EH00402      

規格:100/1000pmol.

為工業客戶提供n*1000pmol規格


質量控制:

純      度: 

經高效液相色譜(SEC-HPLC)和SDS-PAGE檢測,純度大于95%.

 

使用說明:

長期儲存于-80℃,首次使用后保存于-20℃,避免反復凍融。


技術原理:

AapCas12b識別23bp的crRNA,crRNA的其中20bp與DNA靶區匹配。AapCas12b與crRNA和DNA結合后,激活其內切酶活性,在靶DNA下游位點挑選TTTV型的PAM序列,從而切割靶DNA。


特點與優勢:

(1)AapCas12b產生5'懸掛端和3'突出的四核苷酸,這可有利于后續的基因修飾。

(2)AapCas12b具有較高的靶向靈活性,可識別TTTV的PAM,對應更多潛在的靶點。

(3)AapCas12b在植物細胞中的效率較高,可實現更高效的基因編輯。

(4)AapCas12b產生的切割產物末端較平滑,可用于獲得更高的基因編輯效率。


AapCas12b應用:

AapCas12b可用于CRISPR基因編輯,實現基因敲除、替換、激活及抑制等。

(1)作物基因組編輯:實現作物性狀的改良與優化。

(2)生物醫學研究:用于研究基因功能、細胞信號轉導等機制。

(3)病毒載體構建:用于構建基因治療載體,傳送至靶細胞實現體內基因編輯。

(4)抗菌靶向:可用于研發針對某些條件致病菌的靶向治療方法。


AapCas12b在體外診斷IVD領域有重要的應用潛力:

1. 基因檢測

AapCas12b可通過crRNA檢測靶DNA的存在,用于實現基因突變、病原體DNA等的檢測。

工作流程如下:

(1) 設計與靶DNA或突變位點互補的crRNA。

(2) 將crRNA與檢測樣本中的DNA共同溫育。

(3) 如果存在互補的靶DNA,AapCas12b與之結合并激活,切割靶DNA。

(4) 通過聚合酶鏈式反應(PCR)擴增切割產物,或通過熒光定量PCR檢測AapCas12b的活性,判斷靶DNA是否存在。

(5) 相比PCR方法,這種基于Cas12的檢測更加特異和靈敏,實現快速高通量的體外診斷。

2. 病原體檢測

選擇與病原體如病毒、細菌DNA高度保守的區域設計crRNA,可特異性檢測該病原體,用于臨床快速診斷及流行病監測。

3. 腫瘤相關突變檢測

針對常見的腫瘤相關基因突變設計crRNA,可實現腫瘤標記物和治療靶點的檢測,用于腫瘤的早期診斷和針對性治療。

4. 胎兒遺傳病檢測

檢測胎兒DNA中相關遺傳病突變位點,用于產前診斷。優點是檢測快速,通量高和成本低。

5. 轉基因生物檢測

可檢測常見轉基因生物中引入的外源DNA,用于食品安全性監測和環境檢測。

AapCas12b作為一種新型的CRISPR效應蛋白,其基于RNA指導的DNA靶向切割功能,使其在體外快速檢測和診斷方面具有重要的應用優勢。


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