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您的位置:首頁>>生命科學>>酶與輔酶>>E15606S NsiI限制性內切酶試劑盒 25T 240元
Cat. Number
E15606S
Chemical Name
E15606S NsiI限制性內切酶試劑盒 25T 240元
Storage condition
-20 ℃保存
References

重組NsiI限制性內切酶


重組NsiI限制性內切酶是通過基因工程重組技術,可在 5~15 min 內精確完成 DNA 切割的快速限制性內切酶,可識別ATGCA^T位點,適用于快速切割質粒 DNA、PCR 產物、基因組 DNA 等。限制性內切酶系列產品共用一種酶切緩沖液,從而簡化了酶切反應體系, 另外,有良好的酶活冗余度,可輕松處理底物過量或困難模板的酶切。此外,上?;菡\生物提供的去磷酸化、連接試劑在酶切Buffer中具有100%活性,支持一管化反應,提升“酶切-修飾-連接”的體驗。

Color Buffer包括紅色和黃色示蹤染料,可將產物直接用于凝膠電泳。Color Buffer 的紅色染料與 2500 bp 雙鏈 DNA 片段在 1% 瓊脂糖凝膠中遷移速率接近;黃色染料與 10 bp 雙鏈 DNA 片段在 1% 瓊脂糖凝膠中遷移速率接近。


Cat.No.: E15606S

產品名稱:

重組NsiI限制性內切酶


英文名稱:

NsiI


產品組成:

組分規格
NsiI25 μl
10×酶切Buffer1 ml
10× Color Buffer1 ml


識別位點:

5'...A T G C A ↓ T...3'
3'...T ↑ A C G T A...5'


建議反應條件: 

1× 酶切Buffe; 37℃溫育。


最適反應溫度:

37℃


失活條件:

80℃ 溫育 20 min。


反應時間:

可在 5~15 min 內完成反應


保存條件:

-20 ℃保存


用途:

質粒 DNA、PCR 產物或基因組 DNA 等的快速酶切。


使用方法:

DNA 快速酶切流程 

① 在冰上按如下建議的加樣順序配制反應體系:

image.png

a. 本體系適用于經過純化的 PCR 產物酶切。未純化的 PCR 產物具備一定的離子強度,10×Buffer 加入量可適當減少至 2 μl。但由于 DNA 聚合酶同時具有 外切酶活性,會影響酶切產物,因此如下一步需進行克隆等操作,建議酶切前對 PCR 產物進行純化。 

② 輕柔吸打或輕彈管壁以混勻(切勿渦旋),然后瞬時離心以收集掛壁液滴; 

③ 37℃溫育 15 min(質粒),或 15~30 min(PCR 產物),或 30~60 min(基因組 DNA); 

④ 80℃溫育 20 min 即可使酶失活,停止反應(可選)。

2. 雙酶切或多酶切 

① 每種快速內切酶的用量為 1 μl,并根據需要適當擴大反應體系; 

② 所有快速內切酶的體積總和不得超過總反應體系的 1/10; 

③ 如果所用的幾種快速內切酶的最適反應溫度不同,應先以最適溫度低的酶開始酶切,再添加最適溫度較高的酶,在其最適反應溫度下進行酶切 反應。 

3. 適用于質粒的擴大反應體系

image.png

不同 DNA 中的酶切位點數量:

~`Y5NM4L012JODO86WBRU~Y.png

甲基化修飾影響:

A5IY`LKG`[$)PIO)NTHPASM.png

在不同反應緩沖液中的活性:

image.png


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上?;菡\生物科技有限公司自2010年成立以來,一直致力于為客戶提供試劑,儀器設備和耗材一站式服務。目前在蘇州和南通的研發生產基地,專注于體外診斷蛋白,靶標蛋白,工業用酶和細胞因子的生產和定制,按照GMP標準,為工業客戶提供大包裝蛋白原料。

 

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