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您的位置:首頁>>生命科學>>CRISPR系列>>HC80202-04 Crispr Cas12a檢測系統用雙標記探針(DNA Biotin和FAM雙標記)
Cat. Number
HC80202-04
Chemical Name
HC80202-04 Crispr Cas12a檢測系統用雙標記探針(DNA Biotin和FAM雙標記)
Qty 1
1OD/1150元
References

上?;菡\生物提供Cas12a檢測系統用雙標記探針(DNA Biotin和FAM雙標記)。


CRISPR_Cas核酸酶主要包括兩類:一類是RNA引導下可以切割RNA鏈的Cas13a和Cas13b;另一類是RNA引導下可以切割DNA鏈的Cas12a和Cas14。Cas12a和Cas13都有一個共同特點,除了切割靶向DNA或RNA序列之外,還可以切割其他DNA或RNA序列,但是Cas13酶的這種附加切割能力比Cas12a要強。Cas12a的靶基因是ssDNA和dsDNA,并且Cas12a引導鏈需要識別PAM序列(Cas12a的PAM序列為TTTV)。


Cas12a 核酸酶(其他名稱 Cpf1)是依賴于 RNA 介導的內切核酸酶,在靶標 DNA 存在 PAM 的情況下, 可特異地切割靶標雙鏈 DNA。與 Cas9 不同:(1)Cas12a 只需要單個 crRNA,且體積更小、更易 被遞送至細胞中;(2)Cas12a 切割后產生粘性末端,更利于基因組精確編輯;(3)Cas12a 的切 割位點遠離其識別位點,為連續多次編輯提供了可能性;(4)Cas12a 識別的 PAM 序列與 Cas9 不 同,因此提供了不同編輯位點的選擇;針對不同的 Cas12a 蛋白,其識別靶標所需的 PAM 位點不 同,其中部分 Cas12a 蛋白識別 TTN 位點,部分 Cas12a 蛋白識別 TTTN 位點。


DNA探針的標記方法較成熟,有多種方法可供選擇,如缺口平移法、隨機引物法、PCR標記法等,能用于同位素和非同位素標記。

DNA探針技術又稱分子雜交技術,是利用DNA分子的變性、復性以及堿基互補配對的高度精確性,對某一特異性DNA序列進行探查的新技術。DNA探針是利用同位素、生物素等標記的特定DNA片斷,該片斷可大至寄生蟲基因組DNA,小至20個堿基。當DNA探針與待測的非標記單鏈DNA(或RNA)按堿基順序互補結合時,以氫健將2條單鏈連接而形成標記DNA-DNA(或標記DNA-RNA)的雙鏈雜交分子。將未配對結合的核苷酸溶解后用檢測系統(放射自顯影或酶檢測等)檢測雜交反應結果。由于DNA分子堿基互補的精確性,單連DNA探針僅與樣品中變性處理的DNA單鏈出現配對雜交,由此決定了探針的特異性;用放射性同位素(如32P)或生物素標記探針,使雜交試驗同時具有高度的敏感性。


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