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您的位置:首頁>>生命科學>>CRISPR系列>>HC80201-01 Cas9 sgRNA設計合成與純化
Cat. Number
HC80201-01
Chemical Name
HC80201-01 Cas9 sgRNA設計合成與純化
Qty 1
1套
References

Cas9 sgRNA設計合成與純化

RISPR/Cas9可以說是近幾年來生物醫學領域最火的技術了,自2013年誕生以來就光芒四射,給生物醫學領域帶來巨大沖擊,CRISPR/Cas9相關的科研成果頻頻登上頂尖期刊,國內CRISPR/Cas9相關的研究也是如火如荼。


CRISPR-Cas9基因編輯技術就是通過人工設計的 sgRNA(guide RNA)來識別目的基因組序列,并引導 Cas9 蛋白酶進行有效切割 DNA 雙鏈,形成雙鏈斷裂,損傷后修復會造成基因敲除或敲入等,最終達到對基因組DNA 進行修飾的目的。使用CRISPR/Cas9編輯基因成敗的關鍵就在于sgRNA。sgRNA是一個短的合成RNA,只有20bp大小,可以與Cas9蛋白結合,所以在設計sgRNA之前,應在基因組上尋找PAM序列(PAM:Protospacer Adjacent Motif),PAM序列是有固定形式的,來自于不同菌種屬的Cas,它的PAM序列形式是不一樣的。PAM序列應該為-NGG的形式,“N”可以是A,T,C,G中的任何一個。Cas 9其實就相當于是限制性核酸內切酶,使PAM序列前形成DSB(Double Strand Break)。所以,sgRNA其實相當于是向導,告訴Cas 9蛋白在哪進行切割。


sgRNA為體外合成的高純度RNA,可與Cas9蛋白質結合形成復合物,通過電轉、脂質體轉染、顯微注射等方式導入細胞,以核定位信號肽NLS進入細胞核,進行基因編輯。


上?;菡\生物提供Cas9 sgRNA設計合成與純化。


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