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祝賀北京科技大學李正平老師課題組在Talanta (影響因子IF: 6.057)發表論文


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對環狀RNA (circRNA)進行快速、靈敏、特異的檢測對生物學研究和臨床診斷都具有重要意義。 由于大量對應的線性RNA共存,且除了環狀RNA的連接序列外,其他序列都是相同的,對目標環狀RNA的特異性識別現在面臨著很大的挑戰。在本文中,首先利用CRISPR/Cas13a特異性識別目標circRNA的唯一連接序列,并創新性地開發了CRISPR/Cas13a誘導指數擴增對circRNA的敏感性和特異性檢測。 以一對互補的單鏈DNA和五個尿嘧啶核糖核苷酸作為3 '端懸臂,精心設計了一對莖環DNA引物。 一旦Cas13a識別到目標circRNA, Cas13a的反式切割活性就會被激活,尿嘧啶核糖核苷酸就會被切割。 因此,莖環引物的3 '端可以相互延伸,產生大量的雙莖環dna,從而啟動多重環介導等溫擴增(multiple loop-mediated isothermal amplification, LAMP)。 利用Cas13a不斷的切割活性和多重LAMP反應的高擴增效率,低至1fm的目標circRNA都能在30min內靈敏檢測到。 本研究中的方法已成功應用于實際生物樣品中circRNA的檢測,無需分離相應的線性RNA。此外,該方法為所有序列特異性RNA目標的檢測提供了一個通用平臺,表明本研究中的CRISPR/Cas13a(cas13a由惠誠生物提供)誘導指數擴增方法在基礎研究和臨床診斷中都有很大的潛力用于RNA生物標志物的檢測。 

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上?;菡\生物科技有限公司,成立于2010年,企業宗旨“惠質產品,摯誠服務”?;菡\生物致力于成為一站式科學服務商,產品覆蓋設計開發過程,提供實驗室設計、實驗室建設、儀器設備、耗材、物資管理、試劑、技術服務等專項配套服務?;菡\生物在上海建立研發中心,在湖北和江蘇有生產基地,在廣州和深圳建立子公司,立足上海,銷售網絡遍布全國,為客戶提供全方位的綜合服務。


CRISPR是一種出色的基因組編輯工具,比較熟悉的是來自化膿鏈球菌的Cas9(SpCas9),不過這并不是唯一的選擇。一種新型核酸酶Cas13a(以前稱為C2c2)正開始進入人們的視野,它具有獨特的性質,進一步擴展了CRISPR工具箱。


惠誠生物提供的提供的cas酶包括:

CRISPR-Cas13a

重組CRISPR-Cas12a蛋白 Recombinant CRISPR-Cas12a protein

重組CRISPR-Cas9蛋白 Recombinant CRISPR-Cas9 protein


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